产品名称:81孔液氮罐专用冻存盒说明书
规格:>100次
储存条件:—20℃,12个月
用途:又称培养细胞消化液,用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化。
注意事项:无菌溶液,经过滤除菌处理。主要由胰酶或胰蛋白酶、edta组成,含酚红。自备材料:
1、 pbs、hanks液或无血清培养液
2、 显微镜
3、 离心机
操作步骤(仅供参考):
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 pbs、hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 trypsin-edta solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 trypsin-edta solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
注意事项:
1、 尽量减少反复冻融的次数,以免失效。
2、在使用 trypsin-edta solution 过程中,要特别注意避免消化液被细菌污染。
3、trypsin-edta solution 消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。使用说明:
1. 贴壁细胞的消化:
a.吸去培养液,用无菌的pbs、hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
b.加入少量胰酶细胞消化液(含酚红,不含edta),略盖过细胞,室温放置30秒至2分钟。不同的细胞消化时间有所不同。
c.显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除胰酶细胞消化液(含酚红,不含edta)。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
d.如果发现消化不足,则加入胰酶细胞消化液(含酚红,不含edta)重新消化。 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液(含酚红,不含edta)后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2. 组织的消化:
a.不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。 附录:不同胰酶细胞消化液的比较和选择
1. 如果希望消化能力比较强,推荐选择c0201胰酶细胞消化液(0.25%胰酶)和c0203 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶,含酚红),这两种胰酶细胞消化液都含有edta,消化能力相对更强一些。
2. 如果希望观察比较方便,推荐选择含酚红的c0203 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶,含酚红)和c0207 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶,含酚红,不含edta)。
3. 对于酚红可能会干扰后续的测试分析,推荐选择不含酚红的c0201 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶)和c0205 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶,不含edta)。
4. 对于edta可能会干扰后续的测试分析时,推荐选择不含edta的c0205 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶,不含edta)和c0207 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶,含酚红,不含edta)。
5. 对于胰酶特别敏感的细胞,即对于消化时间特别快、消化时间比较难控制的情况,推荐选择c0202胰酶细胞消化液(0.05%胰酶)或c0204 胰酶细胞消化液(0.05%胰酶, 含酚红)。
cfr13i (sau96i) 1000 units
cfr42i (sacii) 1200 units
cfr42i (sacii) 5x1200 units
cfr42i (sacii) 2000 units
csp6i (cviqi) 1500 units
drai 1500 units
drai, hc 7500 units
eam1104i (eari) 300 units
eam1104i (eari) 1500 units
eam1105i (ahdi) 1000 units
ecl136ii (ecoicri) 1500 units
ecoo109i (draii) 2000 units
ecori 5000 units
ecori 5x5000 units
ecori, hc 25000 units
ecori 10000 units
eco24i (banii) 1500 units
eco31i (bsai) 1000 units
eco31i (bsai) 5000 units
eco32i (ecorv) 2000 units
eco32i (ecorv) 5x2000 units
eco32i (ecorv), hc 10000 units
eco32i (ecorv) 4000 units
eco47i (avaii) 800 units
eco47i (avaii) 4000 units
eco47iii (afei) 200 units
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